光譜帶寬,是紫外分光光度計(jì)的一個(gè)重要技術(shù)指標(biāo),很多人都不太清楚該指標(biāo)對(duì)于儀器來(lái)說(shuō)有什么關(guān)系,今天小編簡(jiǎn)單為大家做一個(gè)介紹。
光譜帶寬是紫外分光光度計(jì)分析誤差的主要來(lái)源,一般來(lái)說(shuō),吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度,取決于儀器的光譜帶寬與樣的自然帶寬的比率,自然帶寬被定義為大吸收值的1/2處的吸譜帶寬度。實(shí)驗(yàn)表明,光譜帶寬與自然帶寬的比例小于0.1時(shí),吸光度準(zhǔn)確度可高達(dá)99.5%;如果比例增大,則吸光度測(cè)量誤差會(huì)增加,當(dāng)自然帶寬大于或等于20時(shí),2nm的光譜帶寬對(duì)于吸光度的準(zhǔn)確測(cè)定是足夠的,可滿(mǎn)足大約99%的日常分析,這也是我國(guó)藥典規(guī)定用于藥檢的紫外分光光度計(jì)的光譜帶寬一定要求≤2nm的原因。研究表明:光度準(zhǔn)確度測(cè)量時(shí),必須注意紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)光譜帶寬的選擇。
1、光譜帶寬小,則對(duì)應(yīng)的狹縫寬度小,此時(shí)的雜散光也小,可提高吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確度。
2、光譜帶寬小,則對(duì)應(yīng)的狹縫窄,但單色光的單色性也好,更能接近單色光,可減少Beer定律的偏離,提高測(cè)量精度。
3、光譜帶寬小,對(duì)同一自然帶寬來(lái)講,波長(zhǎng)準(zhǔn)確度會(huì)高,因?yàn)椴煌牟ㄩL(zhǎng),有不同的摩爾吸光系數(shù),所以,波長(zhǎng)準(zhǔn)確度高時(shí),光度準(zhǔn)確度測(cè)試誤差小。
但必須注意:光譜帶寬不能太小,否則信號(hào)弱,儀器的信噪比小,靈敏度差。
很多人會(huì)混淆紫外分光光度計(jì)狹縫寬度和光譜帶寬,其實(shí)這是不對(duì)的,原因如下:
1、狹縫寬度是指紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)狹縫的機(jī)械寬度。一般來(lái)講,儀器的狹縫寬度是一個(gè)保密數(shù)據(jù)。因此,制造商不會(huì)或沒(méi)有必要在儀器說(shuō)明書(shū)中、在有關(guān)的儀器樣本上給出儀器的狹縫寬度,所以講狹縫寬度為:多少是沒(méi)有根據(jù)的。
2、儀器制造商應(yīng)該或必須告訴用戶(hù)儀器的光譜帶寬是多少。因?yàn)楣庾V帶寬是紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)分析誤差的主要來(lái)源,往往不同的試樣要求用不同的光譜帶寬測(cè)試,對(duì)試樣來(lái)講,有理想的光譜帶寬的要求。